Dag 2

Dag 2
PCR-reaktion för kontroll av insert. Kontroll av plasmidpreparat och PCR-produkt med gelelektrofores och Klyvning av plasmid-DNA med EcoR1.

I dag 2 utförde vi PCR-reaktion för att få många kopior av DNA molekyl, och det gick helt perfekt.
Med hjälp av gelelektrofores skulle vi kunna veta om plasmid DNA har LL 37 gen eller inte, samt att kontrollera om vi inte har carry over kontamination. Men tyvärr vi kunde inte veta ingenting om vårt DNA !!!. Då använde vi TAE-buffert som hade pH vid 4 istället för 7 eller 8. Brunnarna som vi hade var blåa i början,men efter ca 30 min ändrades färgen och blev gul, det p g a den sur miljön och det leder till att bli för mycket positiva protoner som påverkar på DNA laddning. Vårt DNA blev positiv laddat och det gör att den blåa färgen inte binda.

Så vi kunde inte nå vårt syfte med denna laboration så vi ska köra gelelektrofores nästa vecka.